TIRF 顯微鏡濾光片

在基于物鏡的 TIRF 中，激光被二向色鏡反射進入物鏡，發生全反射后會再次被二向色鏡反射，發射片不僅要阻擋入射激光的散射光，還要阻擋全反射后的激光以及高角度的散

射光。相對于共聚焦顯微鏡，TIRF 需要更高的截止深度 (OD8 -10+) 才能消除激光噪音的干擾。

為了保證形成較好的漸逝場，避免溶液本底中樣品的激發，TIRF 對二向色鏡平整度的要求要高于普通激光顯微鏡，需要控制在 0.5 waves/inch (flatness) 及以下。另外，二向色鏡的厚

度也必須在 2mm 及以上，以避免安裝固定時外界應力對平整度的影響。

ET 系列 - TIRF 單波段帶通濾光片組

單個發射片具有 OD6 - 7 的截止深度，在單色TIRF 濾光片組中，通過將一個帶通發射片和一個長通發射片組合使用，可以實現 OD12+ 的截止深度。常規的顯微鏡cube 只能安裝最大厚度3.5 mm 的發射片和1mm 厚的二向色鏡，TIRF 濾光片組需安裝在的TIRF cube 中。

ET 系列 - TIRF 單波段長通濾光片組

ET 系列 - TIRF 多波段帶通濾光片組

對于多色 TIRF，根據顯微鏡結構的不同，會有兩種不同的濾光片組配置。如果顯微鏡配有濾光片轉輪，可將一個常規的多波段發射片 (OD6 - 7 的截止深度) 裝到顯微鏡cube 中，在濾光片轉輪中裝上相應數量的單波段帶通發射片 (OD6 - 7 的截止深度，最后一個波段可用長通發射片 )。通過轉輪切換不同的帶通發射片可收集不同波段的熒光信號。將單波段帶通發射片和多波段發射片匹配使用可在對應激光波長處提供OD12+ 的截止深度。

對于沒有濾光片轉盤的顯微鏡，通過較好的工藝將兩片相同的多波段發射片 (OD6 - 7 的截止深度 ) 封裝到一個金屬外圈中（厚度較常規濾光片要厚），從而實現 OD8 - 10+ 的截止深度。

1. 405 nm 激光用于光激活。

Chroma TIRF 專用 cube

相比于常規激光顯微鏡，TIRF 對二向色鏡的平整度和厚度都有更高的要求。平整度需要控制在 0.5 waves/inch 及以下，二

向色鏡的厚度也必須在 2mm 及以上，以避免安裝固定時外界應力對平整度的影響。常規的顯微鏡 cube 無法安裝厚度 2mm 及

以上的二向色鏡。另外，由于材質主要為塑料，抗形變能力也較差。針對 TIRF 應用，我們推出了具有保護的 TIRF 專用

cube ，具有如下特點：

(1) 能夠安裝最大3 mm 厚度的二向色鏡；

(2) 能夠安裝最大厚度6 mm 的發射片，可以通過兩個發射片疊加的方式提高在激光譜線及其附近的OD 值；

(3) 金屬材質，抗形變能力強，對安裝的二向色鏡不會產生應力。

1. Chroma TIRF cube 不單獨出售，需由 我們安裝 TIRF 二向色鏡并校正其平整度；

2. TIRF 二向色鏡采用膠水固定。